Molecular weight analysis by MS-MALDI TOF

Laboratorio de Análisis Proteómico provisto de la tecnología necesaria para el análisis cualitativo y cuantitativo de proteomas a gran escala así como para la identificación y cuantificación de péptidos y proteínas diana. El laboratorio ocupa un espacio de 90 m2 en el que se disponen 4 espectrómetros de masas (4800 MALDI-TOF/TOF, Quantum Triple Quadrupole , LTQ Velos Linear ion trap y Orbitrap XL), diversos sistemas acoplados para cromatografía líquida convencional y nanocapilar (2xAgilet 1200, 2X Agilent 1100) y un sistema de IEF preparativo (IEF off-gel). Dispone asimismo de un robot para digestión automática (DigestPro MS, Intavis) y de los sistemas necesarios para la realización de geles 2D de tamaño pequeño y grande (2 x IPGphor y 2 x Ettan Dalt VI (GE), Protean y MiniProtean (BioRad)) así como para la adquisición y análisis de las imágenes (Scanner y SameSpots software). Dispone asimismo de aparataje propio necesario para el trabajo diario (centrífugas, arcones, etc).

PROTEÓMICA El equipamiento actual del Servicio es el siguiente: 2 unidades de isoelectroenfoque Protean IEF cell (BIO-RAD), para la primera dimensión de los geles 2D en tiras de 7 cm de diferentes rangos de pH: 3-10 no lineal, 3-10-lineal y 4-7 lineal. 1 Cubeta multigel Miniprotean Dodecacell (BIO_RAD), para la electroforesis simultánea de hasta 12 geles de 8 x 7 cm. Espectrómetro de masas MALDI-TOF-TOF Autoflex III (Bruker).. Espectrómetro de masas Q-Exactive (Thermo Scientific) dotado de una fuente de ionización nano conectada en línea a un nano-UPLC Easy-LC 1000.

El objetivo principal del servicio es dar apoyo científico y tecnológico en el área de la proteómica a los investigadores del IQAC y IDAEA así como de otros ámbitos, tanto públicos como privados. Entre nuestras principales actividades se encuentra la separación, cuantificación, identificación y caracterización de péptidos y proteínas en sistemas de interés biológico y biomédico mediante técnicas de electroforesis bidimensional y espectrometría de masas. Otras actividades que realizamos mediante espectrometría de masas es la determinación de la masa molecular de diferentes especies moleculares tanto de origen sintético como ambiental facilitando así su elucidación estructural. El servicio dispone de la técnica MALDI MSImaging que permite detectar la distribución de moléculas de diferentes masa en un corte de tejido u otro tipo de material sin necesidad de marcaje. El laboratorio dispone de un sistema completo de separación de proteínas mediante electroforesis bidimensional.

El servicio de Espectrometría de Masas comprende 4 espectrometros de masas con diferentes analizadores y sistemas de ionización. La técnica permite la caracterización de sustancias a partir de su masa molecular y la masa de iones obtenidos por la fragmentación molecular. La espectrometría de masas puede ser utilizada tanto en análisis cualitativo como cuantitativo y su alta sensibilidad permite llegar a muy bajos límites de detección. Además, el acoplamiento con la cromatografía de líquidos (HPLC) permite el análisis de mezclas complejas. Este Servicio presta apoyo a la actividad investigadora del Centro así como a usuarios de otras instituciones externas.