BIOSENSORES UNIVERSALES

EL GRAN BENEFICIO DE LOS BIOSENSORS ES SU CAPACIDAD DE DETECTAR DE FORMA RAPIDA Y PRECISA LA PRESENCIA DE DISTINTOS COMPUESTOS EN EL MEDIO. UNA GRAN VENTAJA DE LOS BIOSENSORS SOBRE OTRAS TECNICAS DE DETECCION ES QUE ESTOS NO NECESITAN UN INSTRUMENTAL SOFISTICADO. LOS BIOSENSORS SUPONEN UN ENORME INTERES BIOTECNOLOGICO REFLEJADO EN LAS MAS DE 8000 PATENTES MUNDIALES QUE CONTIENEN ¿BIOSENSOR¿ EN SU TITULO. LA MAYORIA DE LOS BIOSENSORS SON DEL TIPO ¿CELULAS COMPLETAS¿, CONSISTENTES EN BACTERIAS VIVAS Y BASADOS EN EL RECONOCIMIENTO CELULAR DE UN COMPUESTO QUE PROVOCA CAMBIOS EN LA TRANSCRIPCION DE UN GEN REPORTERO. TALES BIOSENSORS PRESENTAN DESVENTAJAS COMO LA NECESIDAD DE ACTIVAR LOS MICROORGANISMOS, EL EFECTO DE LOS COMPUESTOS EN LA VIABILIDAD CELULAR Y PROBLEMAS DE BIODISPONIBILIDAD. EL OBJETIVO AQUI ES EXPLOTAR LOS AVANCES EN INVESTIGACION DE SENSORES BACTERIANOS TAL COMO LA IDENTIFICACION DEL PERFIL DE LIGANDO DE DOMINIOS SENSORES Y LA INVESTIGACION SOBRE LOS SISTEMAS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES BASADOS EN DOMINIOS GGDEF. EL PROYECTO SE BASA EN LA ABUNDANTE FAMILIA DE PROTEINAS QUE CONTIENEN UN DOMINIO GGDEF Y UN DOMINIO SENSOR EN SU EXTREMO N-TERMINAL. SABEMOS QUE LA UNION DEL LIGANDO AL DOMINIO SENSOR ALTERA LA ACTIVIDAD CATALITICA DE LOS DOMINIOS GGDEF. PROPONEMOS AQUI LA CONSTRUCCION DE UN NOVEDOSO TIPO DE BIOSENSOR BASADO EN UN ENZIMA CUYOS DOMINIOS SENSORES ESTARAN BIEN CARACTERIZADOS (EJ: LOS DE AROMATICOS O EL DE LA UREA) Y FUSIONADOS CON EL N-TERMINAL DE DOMINIOS GGDEF, SUSTITUYENDO EL DOMINIO SENSOR NATIVO. LOS DOMINIOS GGDEF ESCOGIDOS HABRAN DEMOSTRADO SER ACTIVOS IN VITRO. NUESTRA HIPOTESIS SE BASA EN LA PRESUNCION DE QUE LA UNION DEL LIGANDO AL ENZIMA QUIMERICO ALTERARA LA ACTIVIDAD GGDEF Y PODRA SER MONITORIZADA MEDIANTE ENSAYOS BASADOS EN EL VERDE MALAQUITA QUE PERMITEN LA DETECCION DE CANTIDADES PICOMOLARES DE FOSFATO INORGANICO. LA PRUEBA NO REQUIERE DE APARATAJE PUES LA PRESENCIA DE LIGANDO DA LUGAR A UN COLOR VERDE DETECTABLE A SIMPLE VISTA.